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由于朊病毒的特殊性,周文做实验时格外小心。
生物口罩、生物手套、生化防护服,武装齐全。
而秦海涛他们四个人,只是帮忙打下手,没有直接接触装有病毒的器皿。
检测朊病毒,目前一共有四种方法。
1,电镜法。
2,毛细管SDS-凝胶电泳法。
3,荧光标记肽链的毛细管电泳免疫测定法。
4,双色强荧光目标扫描法。
其中第二种“凝胶电泳法”是最好、最直接的检测方法。
主要是通过理化方法--差速、超速离心,sodiumN-lauroylsarcosine(月桂酰肌氨酸)、PK处理,提纯PrPsc。
然后在“毛细管电泳仪”上进行毛细管SDS-凝胶电泳。
根据各组分通过检测器时,在214nm波长处产生吸收峰的时间和峰形,鉴别出朊病毒病原因子PrPsc。
这个方法标本用量少,而且不需要免疫学试剂,判断很直观。
缺点是需要用到“超速离心机”以及“专用毛细管电泳仪”这两样设备。
超速离心机,目前基本上都是采购的国外品牌,售价高达50万RMB起。
而朊病毒专用毛细管电泳仪也非常昂贵,需要二十多万RMB。
价格昂贵就算了,关键用到的机会少啊。
一般医院连采购设备的钱都赚不回来,也只有像江州医院这样有钱的三甲医院才会采购。
正因为如此,大城市的医疗资源才稀缺。
小城市得了个怪病,你连检测都做不了。
周文按照理化方法,一步步小心翼翼的制备试剂、提取稀释液、放到超速离心机上分离变异朊病毒蛋白。
刚刚升级的生物免疫学,让他更加的得心应手。
在这个过程中,周文也在教导秦海涛以及董文颖几个人,告诉他们常规朊病毒理化试验过程中需要注意的地方。
“添加月桂酰的时候,你们一定要记住……”
这些经验,别说大学教授了,就算是国内那些朊病毒研究所的专家也讲不清楚。
因为国内在病毒、尤其是朊病毒研究方面,基本上还处于初级阶段,这些实用经验,只有国外那些顶尖研究所才能掌握。
比如英国肯特大学酵母朊病毒研究所。
长久以来,朊病毒蛋白领域的新发现,几乎都被几个酵母领域的研究团队“垄断”。
那些顶尖研究所,是不会轻易把技术教授给你的。
除非你能拿到他们的offer。
而秦海涛他们显然还没有意识到自己是有多么的幸运,只是觉得周文的讲解非常的浅显易懂,甚至连动作要领都一并告诉了他们。
在周文说的时候,秦海涛和董文颖两个人都是聚精会神的听着。
至于另外两个老实验员,虽然表面上在听,实际上根本没有听进去。
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