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第十题,实验设计题。请同学们一篇材料。
核酸限制性内切酶是重组DNA技术中最重要的工具酶之一,它是一类能识别双链DNA中特定碱基序列,内切方式水解DNA链的核酸水解酶。最适合基因工程操作的限制内切酶为第二类内切酶,这类酶的一个重要特点是切割的断裂点都在反转重复序列上,亦称回文式序列,如:
EcoRI
5’-G↓AATTC-3’
3’-CTTAA↑G-5’
BamHI
……
请设计一个质粒DNA的限制性内切酶酶解鉴定实验。
‘还好我做过核酸的其他实验,这个核酸限制性内切酶的实验设计,编吧!’
兰杰并没有亲手做过限制性内切酶的实验,他也很想做啊,然而限制内切酶是昂贵的生化试剂,教练不给他做。
这个时候,兰杰只能依靠类似实验的操作经历及丰富的理论知识储备,进行合理的编排。
第一步,酶切反应。
第二步,电泳凝胶板的制备。
第三步,电泳加样。
第四步,电泳与鉴定。
兰杰首先设计出四个主要的实验步骤。
需要的实验材料包括:质粒DNA、反应缓冲液、BSA、限制性内切酶……
需要的实验器材包括:电泳槽与电泳仪、紫外检测仪、电热恒温水浴箱……
然后就是细化每一个步骤,写出具体的实验操作细节。
‘设计完了,理论上应该是可行的。’
兰杰从头到尾检查一遍试卷,刚检查完,铃声响起,交卷。
明天将进行实验考试,雷天刚对他的队员们说:“理论考试自我感觉良好的同学,可以和我们教练团队沟通一下理论考试的情况。自我感觉一般的同学,你们回宿舍好好休息,调整状态,积极备战明天的实验考试。”
雷天刚说罢,有一半的队员回去休息了,剩下的一半队员跟教练们对答案。
“对对对!我是这么写的!”
“哈哈!我又做对一题!”
“啊?错了?”
“又错了?”
“第六题之后,我全错?”
“我特么心态崩了啊!”
……
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